测定意义:
Pro广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,逆境条件下,植物体内Pro含量显著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性,抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此,脯氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。
测定原理:
用磺基水杨酸(SA)提取Pro,加热处理后,Pro与酸性茚三酮溶液反应生成红色;加甲苯萃取后,在520nm测定吸光度。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、冰乙酸、甲苯、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:冰乙酸25 mL(自备);
试剂二:液体25 mL×1瓶, 4℃保存;
试剂三:甲苯50mL(自备)。