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二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)
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筛选 分光光度法
货号:N-SH080629
¥2755
25管/24样 ¥2755
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产品信息

测定意义:

 

二磷酸核酮糖羧化酶(EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一个关键酶,既控制着CO2的固定,同时又制约着碳素向Calvin循环和光呼吸循环分流,其活性的大小直接影响着光合速率。

 

测定原理:

 

(1)在Rubisco的催化下,1分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)与1分子的CO2结合,产生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA);

(2)PGA可通过外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用,产生甘油醛-3-磷酸,伴随着NADH氧化生成NAD+

(3)在340 nm NADH有特征吸收峰,而NAD+没有此吸收峰,因此测定340nm吸光度下降速率可以代表Rubisco的羧化酶活性。

 

需自备的仪器和用品:

 

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

 

试剂的组成和配制:

 

提取液一:液体25mL×1瓶,4℃保存。

提取液二:液体25mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:30mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入12.5mL试剂一,充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入12.5mL试剂一,充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

试剂四:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入1.25mL试剂一,充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

 

(注意:试剂二、三、四溶解后,按需分装-20℃保存。)


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