测定意义:
脯氨酸脱氢酶(Proline dehydrogenase,ProDH)是存在于线粒体内的催化脯氨酸降解的关键酶。脯氨酸是分布最广泛的一种渗透物质,在胁迫条件下很多植物可以通过增加合成、减少降解而在体内累积大量脯氨酸,降低ProDH活性对于调节渗透平衡、防止渗透胁迫对植物造成伤害、清除自由基、保护细胞结构具有重要意义。
测定原理:
ProDH催化脯氨酸过程中产生的氢可通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),DCPIP在600nm处具有特征吸收峰,通过测定600nm处吸光度的下降速率,可代表ProDH活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃/石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂清单:
试剂名称 | 规格 | 数目 | 贮藏 |
提取液 | 液体 60mL | x1 | 4℃ |
试剂一 | 液体 2mL | x1 | 4℃ |
试剂二 | 液体 50mL | x1 | 4℃ |
试剂三 | 粉剂 | x1 | 4℃ |
试剂四 | 粉剂 | x1 | 4℃,避光 |
试剂五 | 粉剂 | x5 | 4℃,避光 |