测定意义:
GPT(EC 2.6.1.2)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化氨基酸和酮酸转氨基反应,在氨基酸代谢中具有重要作用。此外,哺乳动物肝细胞GPT活性很高,当肝细胞坏死,GPT释放到血液中,血清GPT活性显著增高。因此,GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。
测定原理:
GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应,生成丙酮酸和谷氨酸;丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定520nm吸光度的变化,即可计算GPT酶活力。
自备仪器和用品:
分光光度计、1mL玻璃/石英比色皿(光径1cm)、恒温箱、可调式移液器、低温离心机、震荡仪、冰
试剂清单:
试剂名称 | 规格 | 数目 | 贮藏 |
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提取液 | 液体 80mL | x1 | 4°C |
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试剂一 | 液体 16mL | x1 | 4°C,避光 |
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试剂二 | 液体 16mL | x1 | 4°C,避光 |
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试剂三 | 液体 50mL | x1 | 4°C |
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标准品 | 液体 1.2mL | x1 | 4°C | 2mmol/L 丙酮酸钠 标准溶液 |