测定意义:
肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官,故尿中氨基酸的变化最能反应肝、肾的生理状态。另外,氨基酸还能反应灼伤、伤寒等方面情况。植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。
测定原理:
氨基酸的 α-氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,在 570 nm 有特征吸收峰;通过测定 570 nm 吸光度,来计算氨基酸含量(不包含脯氨酸和羟脯氨酸)。
自备仪器及用品:
台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、无水乙醇、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 60 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1 瓶[1],4℃避光保存。临用前加入 2 mL
无水乙醇,盖紧后充分混匀,再加入 28 mL 试剂二混匀,避光保存。
试剂四:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加 5 mL 试剂二,充分溶解。
[1] 试剂盒中试剂三、试剂四均需临用前配制且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。