测定意义:
蛋白质羰基是多种氨基酸在蛋白质的氧化修饰过程中的早期标志,其含量高低表明蛋白质氧化损伤程度的大小,是衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。
测定原理:
羰基与2,4-二硝基苯肼反应生成红色2,4-二硝基苯腙,在370nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、恒温水浴锅、低温离心机、漩涡震荡仪、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水,无水乙醇,乙酸乙酯。
试剂组成和配制:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂0.1g×5支,4℃避光保存。(使用前根据样品数,每支加1mL水溶解,每支为10个样品用量)
试剂二:液体20mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂四:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂五:(自备)根据测定样品量,将乙酸乙酯和无水乙醇等体积混合。
试剂六:液体100mL×1瓶,4℃保存。