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谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)活性
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筛选 分光光度法
货号:N-SH080195
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产品信息

测定意义

 

GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。

 

测定原理

 

GS 在 ATP 和 Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为 γ─ 谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下形成的络合物在 540nm 处有最大吸收峰,可用分光光度计测定。

 

 

所需的仪器和用品

 

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

 

试剂的组成和配制

 

提取液:30mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:12mL×1 瓶,-20℃保存,临用前 37℃预热 20min,充分混匀,如有沉淀,静置 10min, 取上清待用。

试剂二:12mL×1 瓶,-20℃保存,临用前 37℃预热 20min,充分混匀,如有沉淀,静置 10min, 取上清待用。

试剂三:粉剂×2 瓶, -20℃保存。用时每瓶加入 5mL 蒸馏水充分溶解待用。

试剂四:15mL×1 瓶,4℃保存。


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