测定意义:
AAT是一个多功能蛋白大家族,主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应,在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。
测定原理:
AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇,释放的CoA还原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,测定412 nm吸光度增加速率可计算AAT活性。
自备仪器和用品:
研钵、冰、台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、无水乙醇。
试剂组成和配制:
提取液:液体25mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存。
试剂三:粉剂×1支,4℃避光保存。