测定意义:
乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)属于丝氨酸水解酶,广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE催化乙酰胆碱(Ach)水解,在神经传导调节中起重要作用。
测定原理:
AchE催化硫代乙酰胆碱水解生成硫代胆碱和乙酸,硫代胆碱与巯基显色剂(二硫对硝基苯甲酸(DTNB))作用生成5-巯基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm处有吸收峰,通过测定412 nm吸光度增加速率,计算AchE活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、1mL玻璃/石英比色皿(光径1cm)、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
试剂清单:
试剂名称 | 规格 | 数目 | 贮藏 |
提取液 | 液体 60mL | x1 | 4℃ |
试剂一 | 液体 50mL | x1 | 4℃ |
试剂二 | 粉剂 | x1 | 4℃,避光 |
试剂三 | 粉剂 | x2 | -20℃,避光 |