测定意义:
SH(EC 1.1.1.14)催化山梨醇脱氢生成果糖,是调控生物体内山梨醇含量的关健酶之一。
测定原理:
SH催化山梨醇脱氢生成果糖,同时还原NAD+生成NADH,测定340nm吸光度增加速率可以计算SH活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前每瓶加入15mL蒸馏水,用不完的试剂仍4℃保存。
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入15mL蒸馏水,用不完的试剂仍-20℃保存。