测定意义:
UDPG焦磷酸化酶是生物体糖原合成过程中的关键酶。在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化,将1-磷酸葡萄糖与UTP分子合成为UDP-葡萄糖(UDPG)。
测定原理:
UGP可逆催化反应生成1磷酸葡萄糖,在磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下将NADP转化为NADPH,340nm的吸光值增加速率反映了UGP活性。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。
试剂组成和配制:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体25mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃避光保存。临用前加5mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加5 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加5 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂五:液体5mL×1瓶,4℃保存。