测定意义:
土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响。通常按照其最适pH范围,分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。
测定原理:
碱性环境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,通过测定酚的生成量即可计算出S-AKP/ALP活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、蒸馏水、无水乙醇和甲苯。
试剂组成和配制:
试剂一:液体×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。用前加60mL蒸馏水充分溶解。
试剂三:液体×1瓶,4℃保存。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1152μL无水乙醇(自备),48 μL蒸馏水充分溶解。(变褐色后不能再使用)
标准品:液体×1瓶,0.5μmol/mL苯酚标准液,4℃保存。