测定意义:
木聚糖酶(Xylanase EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,中性木聚糖酶(Neutral Xylanase,NEX)一般分离自最适生长pH为6-8的微生物。
测定原理:
木聚糖酶在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,在沸水浴条件下进一步与3,5-二硝基水杨中发生显色反应,在540nm处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在540nm吸光值增加速率,可计算NEX活力。
自备仪器和用品:
天平、离心机、震荡仪、恒温水浴锅、可见分光光度计、1mL玻璃/石英比色皿(光径1cm)、蒸馏水。
试剂清单:
试剂名称 | 规格 | 数目 | 贮藏 |
|
缓冲液 | 液体 40mL | x1 | 4℃ |
|
试剂一 | 液体 10mL | x1 | 4℃ |
|
试剂二 | 液体 30mL | x1 | 4℃,避光 |
|
标准品 | 粉剂 | x1 | 4℃ | 10mg D-木糖 标准粉剂 |