测定意义:
DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛和过氧化氢,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。
测定原理:
二胺氧化酶(DAO)催化二胺生成相应的醛和过氧化氢,产物过氧化氢与4-氨基安替比林等反应产生一种有色物质,其在 510nm 处有最大吸收峰。通过检测 510nm 处吸光值的变化量得出 DAO 酶活性大小。。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂名称 | 规格 | 保存要求 |
提取液 | 液体 60mL | 4℃保存 |
试剂一 | 液体 8mL | 4℃保存 |
试剂二 | 液体 28mL | -20℃保存 |
试剂三 | 液体 5.5mL | -20℃保存 |