测定意义:
游离脂肪酸,也称为非酯化脂肪酸,在与白蛋白结合的血浆中循环。动物血液中的游离脂肪酸 (FFA )含量是一项重要的生理生化指标。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关,游离脂肪酸的浓度会因为糖尿病、重症肝障碍、甲状腺功能亢进等疾病而上升。
测定原理:
用有机溶剂萃取FFA。含有FFA的有机液与三乙醇胺铜反应,在有机相中形成脂肪酸铜 (铜皂) FFA-Cu。Cu离子与显色液(二苯卡巴肼)反应形成紫红色络合物。反应形成的颜色深浅与Cu离子浓度的关系符合朗伯一比尔定律,因此可利用此反应进行比色。
自备仪器和用品:
分光光度计、1mL玻璃/石英比色皿(光径1cm)、可调式移液器、低温离心机、水浴锅、震荡仪、氯仿、冰、蒸馏水
试剂清单:
试剂名称 |
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氯仿 (自备) | (CAS: 67-66-3) |
萃取液 | 按照 氯仿:提取液1:提取液2 200:150:7 体积比混合 (可在试剂盒提供的125mL棕色玻璃瓶中配制) |
试剂名称 | 规格 | 数目 | 贮藏 |
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提取液1 | 液体60mL | x1 | 常温,避光 |
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提取液2 | 液体10mL | x1 | 常温,避光 |
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试剂一 | 液体15mL | x1 | 4°C,避光 |
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试剂二 | 液体15mL | x1 | 4°C,避光 |
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试剂三 | 粉剂15g | x1 | 常温 |
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显色剂 | 液体60mL | x1 | 4°C,避光 |
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标准品 | 粉剂 | x1 | 4°C,避光 | 5mg棕榈酸 标准粉剂 |
空瓶.1 | 棕色(玻璃瓶) 125mL | x1 |
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空瓶.2 | 透明 5mL | x4 |
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