测定意义:
GOT(EC 2.6.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
测定原理:
GOT催化α-同戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定520nm吸光度的变化,即可计算GOT酶活力。
自备仪器和用品:
酶标仪、96孔板、恒温箱、可调式移液器、低温离心机、震荡仪、冰
试剂清单:
试剂名称 | 规格 | 数目 | 贮藏 |
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提取液 | 液体 110mL | x1 | 4°C |
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试剂一 | 液体 6mL | x1 | 4°C,避光 |
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试剂二 | 液体 6mL | x1 | 4°C,避光 |
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试剂三 | 液体 20mL | x1 | 4°C |
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标准品 | 液体 1.2mL | x1 | 4°C | 2mmol/L 丙酮酸钠 标准溶液 |