测定意义:
羟脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)是机体胶原蛋白主要成分之一,胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等,因此HYP含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。
测定原理:
样品经酸水解产生游离的HYP,进一步被氯胺T氧化,氧化产物与对二甲氨基苯甲醛反应,产生红色化合物,在560nm处有特征吸收峰。通过测定560nm处吸光值,可计算HYP含量。
自备仪器和用品:
酶标仪、96孔板、可调式移液器、离心机、烘箱、水浴锅、震荡仪、pH试纸、浓盐酸、蒸馏水
试剂清单:
试剂名称 |
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浓盐酸 (自备) (12mol/L) | 37% 浓盐酸 |
盐酸 (自备) (6mol/L) | 将37% 浓盐酸、蒸馏水 按照1:1比例混匀 |
试剂名称 | 规格 | 数目 | 贮藏 |
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试剂一 | 液体 100mL | x1 | 4°C |
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试剂二 | 粉剂 | x1 | 4°C,避光 |
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试剂三 | 液体 10mL | x1 | 4°C,避光 |
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试剂四 | 液体 15mL | x1 | 4°C |
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活性炭 | 粉剂 2g | x1 | 常温 |
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标准品 | 粉剂 | x1 | 4°C | 1mg 羟脯氨酸 标准粉剂 |