测定意义:
GDH(EC 1.4.1.2)广泛分布于植物中,和谷氨酸合成酶(GOGAT)共同参与谷氨酸的合成,在氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作用。
测定原理:
GDH催化NH4+、α-酮戊二酸和NADH,生成谷氨酸和NAD+,引起340nm吸光度下降。通过测定340nm吸光度的下降速率,计算GDH活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂清单:
试剂名称 | 规格 | 数目 | 贮藏 |
提取液 | 液体 100mL | x1 | 4℃ |
试剂一 | 液体 20mL | x1 | 4℃ |
试剂二 | 粉剂 | x2 | 4℃ |