测定意义:
磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。
测定原理:
6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH,NADPH在340 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm吸光度增加速率,计算6PGDH活性。
自备仪器和用品:
低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体19mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存。