首页产品中心产品类型 生化检测试剂盒微量法辅酶Ⅱ系列
辅酶ⅡNADP(H)含量
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筛选 微量法
货号:N-SH080698
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产品信息

测定意义:

 

辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP+和NADPH含量测定可以计算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一,而且在PPP途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。

 

测定原理:

 

分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP+和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用,使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm下检测吸光值,从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP+为NADPH,从而检测NADP+含量。

 

所需的仪器和用品:

 

酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

 

试剂的组成和配制:

 

酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;

碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体×1支,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀;溶解后4 ℃保存一周;

试剂三:粉剂×1支棕色瓶,-20℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀;溶解后4℃保存一周;

试剂四:粉剂×1支棕色瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀;溶解后4℃保存一周;

试剂五:液体3.6mL×1支,4 ℃保存;

试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;

试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。


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