首页产品中心产品类型 生化检测试剂盒微量法三羧酸循环系列
线粒体柠檬酸(MCA)含量
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货号:N-SH080226
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96样 ¥5400
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产品信息

测定意义:

 

MCA是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。

 

配合测定丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和MCA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和MCA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。

 

测定原理:

 

MCA在柠檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与苯肼反应,生成相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出MCA的含量。

 

自备仪器和用品:

 

分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研钵、蒸馏水。

 

试剂组成和配制:

 

酸性提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

碱性提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体6mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体2mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入6mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存;

 

标准液:液体1mL×1支,10μmol/mL柠檬酸标准液,4℃保存。


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