测定意义
果胶酯酶, 属果胶酶系,亦称为果胶酶、果胶甲酯酶、果胶氧化酶。催化水解果胶长链上的甲氧酯水解产生小分子物质果胶酸和甲醇, 从而增加果胶在水中的溶解度。广泛存在于高等植物和可以降解细胞壁的细菌和真菌中,起内源调控植物细胞壁上及细胞之间果胶含量的作用,在食品工业中具有及其重要的作用和开发前景。
测定原理
果胶酯酶催化水解果胶分子释放 H+,使反应体系的 pH 下降,用碱液维持体系的 pH 始终保持在 7.8(酚酞指示剂维持在粉红色),通过碱消耗的 NaOH 量反映果胶酯酶的活性。
需自备的仪器和用品
天平、研钵、离心机、烘箱。
试剂的组成和配制
提取液:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前每瓶加双蒸水 100mL 充分溶解。(如有不溶现象,磁力搅拌器 40℃加热,或者超声波清洗器超声至完全溶解)
试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加少量蒸馏水溶解,然后转入 500mL 容量瓶,用蒸馏水定容至 500mL。(磁力搅拌器 40℃加热溶解 3 小时左右至完全溶解,提前制备)
试剂二:液体×1 瓶,4℃保存。易挥发,使用后及时用封口膜封口。
试剂三:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:用蒸馏水将试剂三稀释 5 倍,得试剂四。