测定意义:
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。土壤酸性蛋白酶(Solid-Acid Protease,S-ACPT)在酸性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
测定原理:
在酸性条件下,蛋白酶水解酪蛋白底物,产生含有酚基的氨基酸;在碱性条件下,还原福林试剂生成钼蓝与钨蓝,在680nm有特征吸收峰,测定680nm吸光度增加速率,来计算蛋白酶活性。
自备仪器和用品:
酶标仪、96孔板、可调式移液器、离心机、水浴锅、恒温震荡仪、30~50目筛网、蒸馏水
试剂清单:
试剂名称 | 规格 | 数目 | 贮藏 |
|
提取液 | 液体 50mL | x1 | 4°C |
|
试剂一 | 粉剂 | x2 | 4°C |
|
试剂二 | 液体 35mL | x1 | 4°C |
|
试剂三 | 液体 30mL | x1 | 4°C |
|
试剂四 | 液体 6mL | x1 | 4°C,避光 |
|
标准品 | 液体 2mL | x1 | 4°C,避光 | 30μg/mL L-酪氨酸 标准溶液 |
样本处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目(0.27~0.55mm) 筛网;