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土壤硝酸还原酶(S-NR)活性
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筛选 微量法
货号:N-SH080544
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产品信息

测定意义:

 

S-NR催化土壤中硝酸盐还原为亚硝酸盐,是土壤硝态氮还原的关键酶。研究S-NR的活性对合理施肥,降低氮素的损失具有重要意义。

 

测定原理:

 

S-NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ +NADH+H→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下,与对–氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺定量生成红色偶氮化合物;生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰,可用分光光度法测定。

 

需自备的仪器和用品:

 

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

 

试剂的组成和配制:

 

试剂一:液体12mL×1瓶,-20℃保存。

试剂二:液体8mL×1瓶,-20℃保存。

试剂三:液体9mL×1瓶,4℃保存(如出现结晶析出,60℃-90℃水浴溶解后使用)。

试剂四:液体9mL×1瓶,4℃保存。 

试剂五:标准品储备液1mL,-20℃保存。

 

0.1μmol/mL标准液的配制:用时将试剂五稀释100倍,即取 0.1ml 加蒸馏水定容至 10ml。

 

样品处理:

 

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。


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