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土壤中性磷酸酶(S-NP)活性
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货号:N-SH080538
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产品信息

测定意义:

 

土壤磷酸酶是催化土壤有机磷矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的显著影响,根据最适PH范围,一般把土壤磷酸酶分为中性、酸性和碱性三种类型。

 

测定原理:

 

中性环境中,S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,通过测定酚的生成量即可计算出NP活性。

 

自备仪器和用品:

 

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、乙醇甲苯

 

试剂组成和配制:

 

试剂一:液体×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。用前加100mL蒸馏水充分溶解。

试剂三:液体×1瓶,4℃保存。

试剂四:粉剂×2瓶,4℃避光保存。临用前加576μL无水乙醇(自备),24μL蒸馏水充分溶解。(变褐色后不能再使用)

标准品:液体×1瓶,0.5 μmol/mL酚标准液,4℃保存。

 

催化反应:

称取风干混匀土壤约0.1g,加入50μL甲苯(自备),轻摇15min;加400μL试剂一并且摇匀后,置于37℃恒温培养箱,开始计时,催化反应24h;到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀,以终止酶催化的反应。8000g,25℃离心10min,取上清液置于冰上待测


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