测定意义:
总胆固醇(total cholesterol,TC)包括游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)。TC是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料,其血清浓度可作为脂代谢的指标。
测定原理:
利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;最后利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰,其颜色深浅与TC含量成正比。
自备仪器和用品:
水浴锅/恒温箱、离心机、可调式移液器、酶标仪、96孔板、异丙醇。
试剂清单:
试剂名称 | 规格 | 数目 | 贮藏 |
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试剂A | 液体 9.5mL | x1 | 4℃,避光 |
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试剂B | 液体 0.5mL | x1 | -20℃,避光 |
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标准品 | 液体 1.5mL | x1 | -20℃,避光 | 1 mmol/L 标准溶液 |