总抗氧化能力(T-AOC）(ABTS法)-纽莱芙（武汉）生物科技有限公司

总抗氧化能力(T-AOC）(ABTS法)

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筛选微量法

货号：N-SH080032

￥390

96样 ￥390

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产品信息

测定意义：

测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。

测定原理：

ABTS 法是使用最广泛的间接检测方法，可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。ABTS 经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基 ABTS⁺，能溶于水相或酸性乙醇介质中，在 734nm或414nm处有最大吸收。被测物质加入 ABTS⁺溶液后，所含抗氧化成分能与 ABTS⁺发生反应而使反应体系褪色。检测吸光度的变化，并以 Trolox 作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。

自备仪器和用品：

恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。

试剂清单：

试剂名称	规格	数目	贮藏
提取液	液体 120mL	x1	4℃
试剂一	液体 30mL	x1	4℃,避光
试剂二	粉剂	x2	4℃,避光
标准品	粉剂	x1	4℃,避光	1mg Trolox 标准粉剂

样品提取（按照步骤依次操作）：

一、血清、血浆、唾液或尿液等液体样品

（1）血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用 EDTA抗凝）4℃，5000rpm 离心10min，取上清待测；

（2）血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过30天）后再测定；

（3）其他液体样品，澄清可直接检测，若浑浊则离心取上清检测；

二、组织样品

1、按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL提取液）进行冰浴匀浆；

2、然后10,000g离心力 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测；

三、细胞样品

1、按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎（功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；

2、然后10,000g离心力 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测；

注意：

1、样本中尽量避免使用在中碱性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂，否则对本试剂盒的检测结果产生干扰；

2、样品中不宜添加Tween、Triton 和 NP-40 等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂；

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测定原理：

自备仪器和用品：

恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。

试剂清单：

试剂名称

规格

数目

贮藏

提取液

液体 120mL

x1

4℃

试剂一

液体 30mL

x1

4℃,避光

试剂二

粉剂

x2

4℃,避光

标准品

粉剂

x1

4℃,避光

1mg Trolox

标准粉剂

样品提取（按照步骤依次操作）：

一、血清、血浆、唾液或尿液等液体样品

（1）血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用 EDTA抗凝）4℃，5000rpm 离心10min，取上清待测；

（2）血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过30天）后再测定；

（3）其他液体样品，澄清可直接检测，若浑浊则离心取上清检测；

二、组织样品

1、按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL提取液）进行冰浴匀浆；

2、然后10,000g离心力 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测；

三、细胞样品

1、按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎（功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；

2、然后10,000g离心力 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测；

注意：

1、样本中尽量避免使用在中碱性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂，否则对本试剂盒的检测结果产生干扰；

2、样品中不宜添加Tween、Triton 和 NP-40 等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂；

1、按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎（功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；